葡萄糖檢測(cè)試劑盒(Folin-Wu比色法)

葡萄糖(Glucose, Dextrose，Glu)又稱(chēng)玉米葡糖，簡(jiǎn)稱(chēng)葡糖，化學(xué)式C6H12O6，分子量為180.16，是自然界分布

、最重要的一種單糖，屬于多羥基醛，用酶學(xué)方法測(cè)定葡萄糖是生化檢測(cè)中的常用方法，的有葡萄糖氧化酶法、

己糖激酶法，上述酶學(xué)法特點(diǎn)是：1、靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均高；2、使用溫和的反應(yīng)條件；3、對(duì)葡萄糖有專(zhuān)一性，

不受其他糖及還原物的干擾；4、操作簡(jiǎn)便；5、適用于自動(dòng)分析儀。

葡萄糖檢測(cè)試劑盒(Folin-Wu比色法)又稱(chēng)葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-過(guò)氧化物酶偶聯(lián)法等，

其檢測(cè)原理是在葡萄糖氧化酶的催化下葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同時(shí)消耗溶液中的氧，產(chǎn)生的*與氧化色原物質(zhì)

反應(yīng)生成紅色的醌類(lèi)化合物，初始反應(yīng)中*的生成量與葡萄糖濃度成正比，酶標(biāo)儀505nm進(jìn)行比色測(cè)定，

用于人或動(dòng)物的血清、血漿、腦脊液細(xì)胞、組織等樣本中的葡萄糖含量定量測(cè)定，但不宜直接檢測(cè)尿液中的葡萄糖含量，

其中Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L)=90mg/dl。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml，立即取下針頭，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動(dòng)秒表計(jì)時(shí)，并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次，觀察管內(nèi)血液流動(dòng)情況，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時(shí)間，即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時(shí)間的平均值作為ACT 值。

計(jì)算：參考區(qū)間： (1.77±0.76)min

4、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測(cè)血清、尿液等樣品，按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml，如果檢測(cè)組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml。

注意事項(xiàng):

1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于-20°C.

2、實(shí)驗(yàn)用蒸餾水不能含有二氧化碳，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水，并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液，有腐蝕性，請(qǐng)小心操作。

4、TA標(biāo)定液容易長(zhǎng)菌，宜4℃保存，一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請(qǐng)棄用。

5、果實(shí)中含酸量較少時(shí)可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進(jìn)行滴定。

6、TA滴定液含量計(jì)算公式中，V0最好為3次空白測(cè)定的平均值。

7、如果所測(cè)樣品的濃度過(guò)高，應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測(cè)定，并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8、如果樣品顏色較深，滴定終點(diǎn)不易觀察，應(yīng)采用電位滴定法。

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