如何選 ELISA 試劑盒

如何選 ELISA 試劑盒

市面上的 ELISA 試劑盒五花八門，質量良莠不齊。如何浪里淘金，選擇既符合科研需求，又品質上乘的 ELISA 試劑盒呢?

教你七招，快速搞定 ELISA 試劑盒的選擇！

01 查找待測樣本的蛋白濃度

通過檢索 SCI 文獻、Genecards、Mayocliniclabs 等，獲得目標蛋白的表達部位及表達濃度參考值，比較 ELISA 試劑盒中給出

樣本測值與參考值是否一致。

02 明確試劑盒的應用種屬＆檢測的樣本類型

不同廠家驗證的樣本類型不同。除試劑盒特別說明外，一般情況下，不同種屬不能通用。常見待測樣本類型有：血清、血漿、細胞

上清、組織勻漿、細胞裂解液等。實驗前，需要判斷試劑盒能否滿足目標物種的目標蛋白檢測。

03 明確試劑盒的檢測范圍

試劑盒的檢測范圍即標準曲線范圍。標準曲線范圍不等同于樣本濃度范圍，所以，要特別注意判斷待測樣本濃度是否落在標準曲線

范圍內。對于濃度很高的樣本，建議先通過預實驗，摸索出合適的稀釋倍數后，再大量測定樣本。

04 明確試劑盒的國際質控標準

1 稀釋線性

一般指樣本稀釋線性，即：將樣本梯度稀釋，看各稀釋梯度濃度是否成線性；對于高濃度樣本，建議選擇 OD 值落在標曲范圍中

部的稀釋倍數為最佳稀釋倍數。

2 回收率

評估試劑盒測量結果趨于真實值程度的指標。一般添加標準品（重組蛋白）到天然樣本基質內，進行測定。通常，線性及回收率的

范圍在 80%-120% 比較合適。

3 天然樣本檢測

確保試劑盒可以檢測天然樣本及合適的樣本類型。可根據靶蛋白性質對天然樣本進行選擇，例如：血清、血漿、細胞上清、尿液

、唾液和乳汁等。

4 交叉反應

通過交叉反應評估試劑盒的特異性。交叉反應越小，說明試劑盒的特異性越好。

?與同家族其他蛋白或結構類似物的交叉反應。

?與其他種屬相同靶點蛋白的交叉反應。

?與血清中常見因子的交叉反應。

5干擾試驗

判斷其他分子與抗原-抗體對之間相互作用的影響。干擾性越大，待測物測定值越不準確。

?評估靶蛋白配體的干擾。

?評估靶蛋白受體的干擾。

6穩定性

判定試劑盒在規定條件下儲存時間長短的標準。一般通過熱加速穩定性實驗驗證。

?將試劑盒在 37℃ 條件下放置 7 天，與 4℃ 條件下放置的相同產品進行比較。

?各項性能檢測結果的偏差均應 ＜15%。

7 精密度

試劑盒重復實驗時，誤差大小的評估標準。通常用 CV 表示。一般情況下，批間、批內變異系數（CV）均應＜15%。

雅吉生物是一家生物企業主營ATCC細胞，細胞系，原代細胞和培養試劑，重組蛋白，ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑

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