鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)培養(yǎng)説明

鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

鈣(Calcium)是一種金屬元素，常溫下呈銀白色晶體，動(dòng)物的骨骼、蛤殼、蛋殼都含有碳酸鈣,檢測(cè)生命體鈣含量，主要通過檢測(cè)鈣離子濃度實(shí)現(xiàn)的,用分光度法檢測(cè)鈣較為常見該法需要合適的金屬指示劑或選擇性結(jié)合鈣離子后引起變色的染料化合物目前較為常用的染料有鄰-甲酚酞絡(luò)合酮(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚藍(lán)(MTB)等。

雅吉生物鈣檢測(cè)試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)是利用溶液中鈣離子在堿性條件下能與OCPC結(jié)合，生成紫紅色的絡(luò)合物，加入鎂離子螯合劑，去除鎂離子背景干擾，通過分光光度計(jì)檢測(cè)575nm處吸光度，根據(jù)公式計(jì)算出總鈣含量。

該法的優(yōu)點(diǎn)：

1、是國(guó)際上推薦的血清鈣的常規(guī)檢測(cè)方法;

2、試劑單一，操作簡(jiǎn)便;

3、靈敏度高;

4、顯色穩(wěn)定;

5、使用樣本量小。

該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、離心管或試管

2、比色杯、分光光度計(jì)

操作步驟(僅供參考)：

1、制備樣品︰

①血漿、血清樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備，可以直接用于該試劑盒的測(cè)定，-20°℃凍存，用于Ca的檢測(cè)。

②細(xì)胞或組織樣品︰取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行勻漿，低速離心取上清，-20℃凍存，用于Ca的檢測(cè)。

③高濃度樣品︰如果樣品中含有較高濃度的Ca，可以使用ddHzO稀釋，不宜使用普通蒸餾水稀釋。

2、配制Ca顯色工作液︰臨用前，取Ca Assay Buffer和OCPC顯色液等量混合，即為Ca顯色工作液，即配即用;4℃避光保存，不宜久置。

3、Ca加樣︰選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無菌聚乙烯離心管，

按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的鈣離子含量過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置平行管。

4、Ca測(cè)定:混勻，室溫靜置10min ,以空白管調(diào)零，比色杯光徑1cm ,分光光度計(jì)575nm處檢測(cè)，讀取標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管的吸光度(即為A_{標(biāo)準(zhǔn)}，A_測(cè)定)。

計(jì)算:

血清、血漿中鈣(mmol/L)=(A_測(cè)定/A_{標(biāo)準(zhǔn)})×2.5

組織中鈣(mmol/mg)=(A_測(cè)定/A_{標(biāo)準(zhǔn)})×2.5×V/待測(cè)樣品質(zhì)量(mg)

式中:

A_測(cè)定=測(cè)定管的吸光度

A_{標(biāo)準(zhǔn)}=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度

V=組織提取液的總體積(L)

參考區(qū)間∶

健康成年人血清鈣濃度︰2.1~2.6mmol/L

兒童血清鈣濃度:2.25~2.67mmol/L

性能指標(biāo)：

線性范圍:1.25~5.0mmol/L

回收率:98%~101.5%

批內(nèi)CV: 1.08%~1.60%

批間CV∶3.05%~4.12%

注意事項(xiàng)∶

1、溶血樣本對(duì)檢測(cè)有干擾，盡量避免采用溶血樣本。

2、OCPC顯色液偶爾會(huì)結(jié)晶析出，配制成的顯色工作液有時(shí)會(huì)析出，可取上清液使用。

3、該試劑盒對(duì)鈣離子敏感度較高，測(cè)定器皿一定要干凈，最好使用一次性聚乙烯塑料器皿。

4、可用血清或肝素抗凝血漿樣本，不宜采用鈣螯合劑及草酸鹽做抗凝劑的樣本。5、膽紅素可產(chǎn)生負(fù)干擾，含有較高膽紅素的樣本可用血清對(duì)照消除該干擾。

6、本法能夠用于自動(dòng)生化分析儀終點(diǎn)檢測(cè)法。

7、在該試劑盒條件下建議待測(cè)樣品中鈣離子濃度應(yīng)大于0.5mmolL為宜，否則有可能造成檢測(cè)誤差。

8、如果樣品濃度過高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

有效期∶6個(gè)月有效﹔常溫運(yùn)輸，4℃保存。