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細胞培養(yǎng)過程中常見的生物性污染主要包括以下幾類：
| 類別 | 典型代表 | 主要特征與危害 |
|---|---|---|
| 細菌污染 | 大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、假單胞菌等 | 培養(yǎng)基在 48?72?h 內(nèi)出現(xiàn)渾濁、pH 下降，顯微鏡下可見球形、桿形或鏈形細菌；會迅速抑制細胞增殖甚至導(dǎo)致細胞死亡 |
| 真菌污染（酵母 + 霉菌） | 酵母菌、念珠菌、曲霉等 | 初期培養(yǎng)液仍保持清亮，隨后出現(xiàn)絲狀或絮狀漂浮物；顯微鏡下可見出芽球或分枝絲體；生長速度快，難以挽救已被污染的細胞 |
| 支原體（Mycoplasma） | 支原體肺炎支原體等 | 體積極小（0.1?0.3?µm），不被常規(guī)抗生素殺死，肉眼難以發(fā)現(xiàn)；會改變細胞代謝、形態(tài)和基因表達，長期影響實驗結(jié)果 |
| 病毒污染 | 嗜血病毒、腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等 | 體積極小（≈0.05?0.1?µm），光學顯微鏡不可見；常通過血清、細胞系或?qū)嶒炄藛T引入；可導(dǎo)致細胞基因組不穩(wěn)定、死亡或?qū)嶒灁?shù)據(jù)失真 |
| 原蟲（Protozoa） | 阿米巴、鞭毛蟲等 | 在顯微鏡下可見活動的單細胞或多細胞體；大量增殖會直接吞噬或競爭細胞養(yǎng)分，導(dǎo)致細胞死亡 |
| 黑膠蟲（Nematodes） | 黑膠蟲幼蟲等 | 可穿透濾膜，低倍鏡呈黑點狀，高倍鏡可見小蟲游動；常來源于血清或動物組織，雖不一定使培養(yǎng)液渾濁，但會干擾細胞形態(tài)觀察 |
| 交叉污染（非細胞生物污染） | 其他細胞系的混入、細胞系誤認 | 由于操作不規(guī)范或共享培養(yǎng)基/試劑導(dǎo)致；會導(dǎo)致實驗結(jié)果被錯誤細胞系掩蓋，常需通過 DNA 指紋或 STR 鑒定排查 |
補充說明
以上七類是目前文獻中最常提及的細胞生物污染。
除了上述微生物，還可能出現(xiàn) 內(nèi)毒素、增塑劑等化學污染
防控要點（簡要）
嚴格無菌操作：使用經(jīng)濾的培養(yǎng)基、血清，操作時佩戴無菌手套、口罩，避免說話、咳嗽。
定期檢測：顯微鏡觀察、細菌/真菌培養(yǎng)、支原體 PCR、病毒檢測試劑盒等。
使用高質(zhì)量試劑：采購經(jīng)認證的無菌血清、培養(yǎng)基，必要時進行熱滅活或過濾。
防止交叉污染：不同細胞系分開培養(yǎng)、使用獨立的培養(yǎng)器具、定期進行細胞系鑒定。
了解并及時識別這些生物污染類型，是保證細胞培養(yǎng)實驗可靠性和可重復(fù)性的關(guān)鍵。
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